T4 DNA ligase — фермент, катализирующий образование фосфодиэфирной связи между 5′-фосфатом и 3′-гидроксильной группой в двуцепочечной ДНК. Используется для соединения фрагментов ДНК и восстановления разрывов в цепи.

Фермент эффективно лигирует как липкие (cohesive), так и тупые (blunt) концы ДНК, а также способен восстанавливать одноцепочечные разрывы (nicks) в дуплексной ДНК и ДНК/РНК гибридах.

T4 DNA ligase требует ATP в качестве кофактора и обеспечивает надёжное лигирование в стандартных лабораторных условиях. Реакции с липкими концами могут проводиться при комнатной температуре, тогда как лигирование тупых концов может требовать дополнительных условий для повышения эффективности.

Фермент применяется при клонировании, присоединении адаптеров и линкеров, подготовке библиотек и других задачах, связанных с соединением ДНК-фрагментов.